諾博萊德 快捷型植物基因組DNA提取試ji盒(溶液型)

快捷型植物基因組DNA ti取試ji盒 核酸提取

目錄號：40314

試劑盒組成、儲存、穩定性：

本試劑盒在室溫儲存 12 個月不影響使用效果。儲存事項:

1.緩沖液 AP1、AP2 低溫時可能出現析出和沉淀，可以37℃-65℃水浴幾分鐘幫助重新溶解，不要劇烈搖晃，以免形成過量的泡沫。恢復澄清透明后冷卻到室溫即可使用。

2.避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH 值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

  產品介紹：

本試劑盒采用du特的緩沖液系統，特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取基因組 DNA。無需fen/lv仿抽提，使用安全方便，可最大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。對樣品的起始重量沒有限制，實驗者可根據自己的需求靈活調整。提取的基因組 DNA 片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的 DNA  可適用于各種常規操作，包括mei切、PCR、文庫構建、Southern  雜交等實驗。

產品特點：

1. 不需要使用有毒的苯fen、lv仿等試劑。

2. 快速，簡捷，操作整個過程可在 1 個小時內完成。

3. 結果穩定，產量高（比離心柱型的產量高一倍以上），OD260/OD280 典型的比值達 1.7～1.9，長度可達 50Kb-150kb，可直接用于 PCR，Southern-blot 和各種mei切反應以及文庫構建。

注意事項：

1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉速可以達到13,000 rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。

2. 用戶需自備異丙chun、70％乙chun、液氮研缽、水浴箱。

3.開始實驗前將需要的水浴先預熱好備用。

4.本試劑盒為溶液型，可以很容易的按照比例擴大或者縮小每次處理的量，請聯系我們索取其它處理量的操作手冊。

操作步驟：（實驗前請先閱讀注意事項）

1.取適量植物組織（新鮮組織 100 mg 或干重組織 20 mg）在研缽中加入液氮充分碾磨成細粉。

2.轉移細粉到一個 1.5ml 離心管，不要解凍，加入 400μl 緩沖液 AP1 和 4μl RNase A(10 mg/ml)，旋渦振蕩，充分混勻幫助裂解。如果組織裂解困難，可根據需要加一個輕柔勻漿 10 秒的步驟幫助裂解。大多數情況下不需要離心去除未wan全裂解的組織，因為后面有一個離心去除的步驟。

3. 65℃水浴 10 分鐘，在水浴過程中顛倒離心管 2-3 次，混合樣品。

4. 加入 130 μl 緩沖液 AP2，充分混勻，冰上放置 5 分鐘， 14,000 rpm 離心 5 分鐘，小心吸取上清到一個新的 1.5ml 離心管，注意不要吸到界面物質。

5. 可選步驟：將上清液再次 14,000 rpm (~13,400×g )離心 5 分鐘，小心緩慢吸取上清到一個新的 1.5ml 離心管中，不要吸到沉淀。

此步驟目的為去除上清液中的沉淀雜質，使提取基因組 DNA  純度更高。

6. 加入 0.7 體積的室溫異丙chun（例如 500μl 的上清液加 350μl 異丙chun），顛倒 30 次混勻或者直到出現棉絮狀（絲狀）白色 DNA 沉淀。

7.12,000rpm 離心 2 分鐘，在管底可以見到白色的 DNA 沉淀塊，倒棄上清。

8. 加入 1ml 70％乙chun，顛倒幾次漂洗 DNA 沉淀，12,000rpm 離心 1 分鐘， 倒去上清（注意不要把 DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水紙上輕敲幾下以控干殘留乙chun，還可以用槍頭小心吸掉管底沉淀周圍和管壁的殘留乙chun，空氣晾干沉淀幾分鐘。注意不要干燥過頭，否則 DNA 極其難溶；也不能殘留太多乙chun，否則乙chun可能抑制下游如mei切反應。

9.加入適量 DNA 溶解液重新水化溶解 DNA 沉淀，輕彈管壁混勻，可以放置在 65℃溫育 30-60 分鐘（不要超過一小時），期間不時的輕彈管壁幫助重新水化 DNA。也可以在室溫或者 4℃放置過夜來重新水化 DNA。

10.DNA 可以存放在 2-8℃，如果要長時間存放，可以放置在－20℃。

快捷型植物基因組DNA ti取試ji盒 核酸提取